Методы диагностики хеликобактер пилори: анализ крови на антитела, анализ кала методом пцр, уреазные тесты (при фгдс, дыхательный), биопсия с цитологией. Анализ кала на хеликобактер Что показывает анализ кала на хеликобактер

Хеликобактер пилори

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) позволяет увеличить число копий ДНК бактерий или вирусов в миллионы раз с использованием фермента ДНК-полимеразы. Для диагностики достаточно одной молекулы ДНК. Синтезированное количество ДНК идентифицируют методами иммуноферментного анализа или электрофореза. ПЦР-диагностика позволяет обнаружить возбудителя на самых ранних этапах инфекционного процесса, в любой биологической среде организма, с возможностью количественного определения вирусов или бактерий.

Хеликобактер пилори – спиральные грам-отрицательные бактерии, которые были обнаружены на слизистой оболочке желудка более полувека назад, но они не вызывали особого интереса до начала 1980-х гг., когда был разработан метод культивирования организмов из биопсийного материала слизистой оболочки.

В 1983 г. австралийский врач Барри Маршалл обнаружил, что H. pylori почти всегда присутствует в желудке пациентов, страдающих хроническим гастритом или язвой. Бактерии, сами по себе, язвы желудка или двенадцатиперстной кишки не вызывают, однако, провоцируют воспалительные процессы в желудке и ослабляют естественную защиту слизистой от воздействия кислотной среды желудка; при этом H. pylori стимулирует гиперсекрецию соляной кислоты, воздействуя на механизмы ее регуляции. Если проводимая терапия приводит к снижению кислотности желудка, то язва может затянуться, но после прекращения лечения существует вероятность ее повторного возникновения. Длительные наблюдения показали, что у больных, не получавших лечение против H. pylori, язва рецидивирует через 2 года в 100 %, а у пролеченных пациентов возникает повторно (обычно вследствие реинфекции H. pylori) только в 5-10 %. Источником заражения H. pylori является инфицированный человек, кошки, свиньи, крупный рогатый скот и обезьяны (макака-резус). Чаще заражение происходит через загрязнённую фекалиями воду и пищу (овощи, при поливе которых использовалась загрязненная вода). Объектом передачи инфекционного начала могут быть загрязнённые руки, слюна, капли слюны или мокроты при кашле. Исследования, проведенные медиками из США, показали, что H.pylori можно считать семейной инфекцией, и, если в семье выявлен носитель H.pylori, то вероятность остальных членов семьи оказаться инфицированными составляет 95%. Обнаружение хеликобактера методом ПЦР позволяет значительно быстрее установить диагноз, проводить контроль лечения. Материалом для исследования могут служить желудочные аспираты, кал, слюна.

Обращаем Ваше внимание, что взятие урогенитального мазка, мазка из зева, носа, полости рта - платное.

При разных заболеваниях желудочно-кишечного тракта требуется проходить комплексное обследование. Если выявляют бактерию Хеликобактер пилори в кале, то диагностируют гастрит, язву, дуоденит и другие более серьезные болезни. Собирать регулярно каловые массы на определение количества патогенных микроорганизмов требуется и во время медикаментозной терапии, чтобы была возможность следить за положительной динамикой терапии.

В каких ситуациях назначается?

Сдавать каловые массы на анализ требуется при разных патологических нарушениях в системе пищеварения. Бактерии Хеликобактер пилори определяют несколькими методиками, каждая из которых применяется при различных нарушениях. ПЦР анализ кала на антиген нужно сдавать в таких случаях:

• язвенная болезнь желудка;
• образование эрозий в 12-персной кишке и других органах ЖКТ;
• атрофический процесс в слизистой оболочке;
• полипы и новообразования;
• гастроэзофагеальный рефлюкс, характеризующийся забросом желудочного содержимого в пищевод;
• генетическая предрасположенность к разным патологиям органов брюшной полости.

ПЦР-исследование кала - самый точный метод контроля состояния микрофлоры желудка при лечении антибактериальными препаратами.

Патогенная микрофлора провоцирует нарушение стула.

Также можно сдать иммунологический тест, проводимый в таких случаях:

• нарушенный стул, изжога, чувство дискомфорта и другие патологические проявление дисфункции пищеварительного тракта;
• перед проведением курса приема антибиотиков;
• железодефицитная анемия либо тромбоцитопения неопределенного происхождения;
• генетический фактор;
• наличие инфекции у ближайшего окружения.

Подготовка: что надо знать?

Антигенный анализ кала на наличие H. Pylori может дать ложные результаты, если не придерживаются следующие рекомендации:

• За несколько суток до проведения лабораторной манипуляции отказываются от приема антибактериальных и слабительных медпрепаратов. Если терапию прекратить невозможно, то о ней предупреждают доктора.
• Собрать материал для обследования необходимо в предварительно помытую тару, лучше использовать стерилизованную емкость, которую приобретают в аптеке. Категорически запрещено для анализа на Хеликобактер пилори использовать кал после клизмы или применения препаратов со слабительным действием. В таких случаях достоверность результатов низкая.
• Собранный материал доставляют в лабораторию не позже, чем через 12 часов после забора. Если сразу же не удалось сдать анализ на диагностику, то материал хранится на протяжении суток при температуре 2-8 градуса.
• Повторный анализ кала на Хеликобактер пилори сдается спустя месяц после проведения антибактериальной терапии.

Особенности проведения

ПЦР - основной молекулярный способ диагностики

Молекулярно-генетическая диагностика выявит наличие фрагментов ДНК бактерии.

Исследование каловых масс на полимеразную цепную реакцию позволяет выявиться ДНК и РНК бактерии Хеликобактер пилори. Методика относится к молекулярной биологии, вследствие которой фрагменты ДНК патогенного микроорганизма увеличивают в многократном размере. Проводят анализ кала на ПЦР при помощи таких средств:

• Праймер. Помогает обнаружить и обозначить необходимый фрагмент.
• Полимераза. Фермент, который копирует зафиксированный участок цепочки ДНК.
• DNTP. Химические вещества, необходимые для выстраивания новой цепи.
• Образец для анализа.
• Буферный раствор. Посредством жидкости создается максимально приближенной условие для полимеразной цепной реакции.

Методом ПЦР удается накопить специфические участки ДНК в геометрической прогрессии, вследствие процедуры получается из 1-й молекулы больше 100 млн таких же. При помощи такого лабораторного способа исследования кала возможно определить присутствие Хеликобактер пилори даже в небольшом объеме. Если цепь при диагностике не образуется, значит результат теста негативный.

Преимуществом метода ПЦР является автоматизированность, при котором человек принимает минимальное участие в обследовании.

Культуральная методика

Суть анализа в создании питательной среды для жизнедеятельности бактерии.

Хеликобактер пилори может быть обнаружен посредством бактериологического посева кала. Способ диагностики относится к микробиологическим методам. Полученный материал помещают в особую среду, которая является благоприятной для размножения бактерии. Через определенный временной промежуток изучают выросшую культуру при помощи микроскопа. При лабораторном исследовании применяется окрашивание и другие способы, помогающие верно идентифицировать колонию. Помимо этого, выполняется тест на чувствительность к антибиотикам, благодаря чему проще подобрать лечение против Хеликобактер пилори.

Анализ кала на хеликобактер ─ это один из видов диагностики, который подтверждает или опровергает наличие бактерий в организме. Его также проводят для контроля лечения. Тест кала на хеликобактер пилори ─ это неинвазивный (не требующий использования эндоскопии) метод, анализирующий биоматериал.

С диагностикой хеликобактер пилори связано два термина ─ «чувствительность» и «специфичность», на их основании делается заключение анализа.

Чувствительность ─ это способность методики давать положительный результат. Так определяется процент выявления инфекции из общего количества проведенных тестов. Этот параметр посчитать довольно просто.

Специфичность ─ это способность диагностики не давать ложноположительных результатов при отсутствии бактерий. Этот параметр определяет процент отрицательных ответов в группе здоровых людей.

Важно! Язвенная болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки ─ абсолютный показатель для диагностики.

В каких случаях назначают делать этот анализ:

1. Заболевания, относящиеся к онкологическим или предопухолевым. Важное значение анализ имеет при лимфоме желудка, так как на ранних стадиях проводят только антибактериальное лечение без применения химиотерапии.
2. Атрофический гастрит.
3. Хронический хеликобактерный гастрит с развитием кишечной метаплазии (замещением желудочного эпителия кишечным).
4. Дисплазия желудка ─ нарушение анатомических и функциональных свойств эпителия органа.
5. Наличие семейного анамнеза рака желудка, особенно при онкологическом заболевании у родственников первой линии (родители - дети), у которых этот диагноз был доказан.
6. Болезнь Менетрие ─ хронический гастрит, для которого характерна значительная гипертрофия слизистой оболочки с последующим образованием кист и аденом. Она является предраковой патологией, поэтому возникает потребность дополнительно исследовать кал на инфекцию хеликобактер пилори.
7. Устойчивая функциональная диспепсия более шести месяцев, особенно при болях в эпигастральной области.
8. Подготовка к длительному применению нестероидных противовоспалительных препаратов, ацетилсалициловой кислоты.
9. У пациентов, которые вынуждены длительно употреблять ингибитор протонной помпы (при болезнях пищевода, для профилактики гастропатии).
10. Заболевания крови ─ тромбоцитопеническая пурпура, идиопатическая железодефицитная анемия.

1. Метод автоматизирован, и участие человека в процессе исследования минимальное.
2. Диагностическая ценность метода достаточно высока (до 98%).
3. В условиях современной лаборатории не дает ложноположительных результатов.

Недостатки:

1. Отрицательный результат анализа не исключает наличия возбудителя в организме.
2. Универсальность тест-системы бывает ограничена в связи с разновидностью штаммов бактерий.
3. Результаты исследования биоматериала сложно стандартизировать. Практически невозможно выровнять количество исследуемого материала для сравнения разных образцов между собой.
4. Результаты ПЦР не могут быть окончательными и основополагающими при постановке диагноза.

Бактериологический посев

Анализ на бакпосев h. pylori представляет собой сложный, трудоемкий процесс. Для выращивания живой культуры требуются специальные условия. Как правило, подобные исследования проводят в научно-исследовательских центрах или учебных заведениях, имеющих клиническую лабораторию.

Посев не является 100%-но специфичным методом. Хеликобактер часто невозможно высеять, так как сдать биологический материал правильно не всегда удается. Он может не содержать колонии культивируемого микроорганизма. Также бактерии погибают при нарушении правил сбора материала или его транспортировки.

Поэтому данный метод применять для диагностики нецелесообразно. Его используют для научных экспериментов.

ИХА кала (иммунохроматографический анализ)

Это иммунохимический метод, основ
анный на распределении исследуемого образца между неподвижной и подвижной фазой и на свойстве антител связываться с антигеном избирательным образом.

Подвижная фаза, содержащая анализируемый материал, перемещается через неподвижную. При этом многократно повторяются акты сорбции (поглощения) и десорбции (выделения). Так происходит идентификация вещества (бактерий).

Преимущества:

• простота и удобство, метод не требует дорогостоящего оборудования;
• достоверность тестов - 99%;
• доступность (более экономичный метод в сравнении с ИФА).

К недостаткам методики можно отнести тот факт, что результат анализа зависит от качества моноклональных антител, которые используют при производстве тест-систем, а также от концентрации бактерий в биоматериале, которые не всегда могут обнаруживаться.

Правила забора материала

Чтобы итоговые показатели анализа были достоверными, нужно знать, как правильно сдавать пробу.

Биоматериал собирают в чистую сухую емкость. В нем не должно содержаться примесей мочи или крови. Оптимальный вариант, если кал собран утром, перед доставкой в лабораторию. Если такой возможности нет, то можно взять и вечернюю пробу. При этом ее нужно хранить не более 10 часов в холодильнике при температуре, не превышающей 8 °C.

Перед тем как сдавать кал, за 72 часа до исследования следует отменить прием лекарственных препаратов. При нарушении перистальтики, наличии запоров пациенту назначается мягкое слабительное (лактулозу) для предупреждения ложного результата.

Для контроля лечения инфекции h. pylori анализ кала проводят не раньше чем через месяц после окончания антибактериальной терапии.

Когда можно сдать анализ кала на антиген хеликобактер пилори?

Какие значения имеет анализ кала методом ПЦР на антиген хеликобактер пилори?

Дыхательный уреазный тест на хеликобактер пилори

• Что представляет собой дыхательный уреазный анализ на хеликобактер пилори?
• Как сделать анализ при помощи дыхательного уреазного теста с мочевиной, меченной изотопами углерода?
• Как выявить хеликобактер пилори при помощи анализа дыхательный уреазный тест 13С?
• Выявление хеликобактер пилори при помощи дыхательного анализа хелик-тест
• Дыхательный уреазный тест: как расшифровываются результаты?
• Если вы решили сдать дыхательный уреазный тест на хеликобактер пилори: подготовка
• В каких случаях дыхательный уреазный тест на хеликобактер может показать ложный отрицательный результат?
• Прием лекарственных средств и подготовка к тесту на хеликобактер
• Является ли положительный дыхательный уреазный тест на хеликобактер показанием к назначению схемы лечения антибиотиками?

Уреазный экспресс тест на хеликобактер пилори при ФГДС (гастроскопия)

• Если экспресс тест на хеликобактер положительный, что означает хеликобактер один плюс, хеликобактер два и три плюса?

Биопсия с цитологией – точный анализ на хеликобактер

• Что представляет собой биопсия и цитология как обследование на хеликобактер?
• Как определить количество хеликобактер пилори по результатам цитологии? 3 степени обсемененности патогенными бактериями

Какие титры антител IgG к хеликобактер пилори являются показанием к обследованию ближайших родственников на хеликобактериоз? Какое исследование на хеликобактер пилори лучше пройти, чтобы определить, норма у меня или патология?

Сайт предоставляет справочную информацию исключительно для ознакомления. Диагностику и лечение заболеваний нужно проходить под наблюдением специалиста. У всех препаратов имеются противопоказания. Консультация специалиста обязательна!

Методы диагностики хеликобактер пилори - видео

Какие анализы на хеликобактер пилори необходимо сдать, чтобы поставить правильный диагноз?

Сегодня существует несколько методов определения хеликобактер пилори в организме человека. При подозрении на хеликобактериоз, как правило, назначают следующие исследования:

• анализ крови на антитела к хеликобактер пилори (присутствие антител указывает на распознание бактерии иммунной системой человека);
• анализ кала на антиген хеликобактер (наличие генетического материала возбудителя хеликобактериоза в кале);
• дыхательный тест на определение уреазной активности хеликобактер пилори в желудке;
• цитологическое исследование полученного при фиброгастродуоденоскопии участка слизистой оболочки желудка (обнаружение хеликобактер пилори под микроскопом).

Для увеличения точности диагностики , как правило, назначают минимум два анализа, производящие определение хеликобактер пилори различными методами.

Анализ крови на антитела к хеликобактер пилори

Что означает сдать иммуноферментный анализ крови (ИФА) на бактерию хеликобактер пилори?

Иммуноферментный анализ на бактерию хеликобактер пилори (записаться) представляет собой исследование плазмы крови, во время которого с помощью специальных химических реакций определяют концентрацию (титры) антител к возбудителю хеликобактериоза.

Дело в том, что при попадании в организм генетически чужеродного белка, каковым является хеликобактер пилори, включаются сложные иммунные механизмы защиты, среди которых образование антител, предназначенных для ликвидации "чужака".

Так что в тех случаях, когда в крови или других биологических материалах обнаруживаются антитела к какой-либо инфекции , можно говорить о том, что данный чужеродный агент посетил человеческий организм и был распознан иммунной системой.

Однако следует помнить, что для появления выраженного иммунного ответа необходим определенный промежуток времени, так что антитела к инфекции появляются через некоторое время после заражения.

Поэтому возможны ложнонегативные результаты анализа, когда болезнетворный микроб уже проник в человеческий организм, но иммунная система еще не успела ответить должным образом.

С другой стороны, специфические антитела сохраняются еще некоторое время (а иногда и пожизненно) после полной элиминации инфекционного агента из организма. Поэтому возможны ложнопозитивные результаты у уже выздоровевших людей.

Чтобы хотя бы частично преодолеть недостатки исследования, используется фракционный анализ иммуноглобулинов (IgG, IgM и IgA), которые представляют собой разные виды антител, вырабатываемых клетками иммунной системы.

Антитела IgG к хеликобактер пилори – что это?

Антитела IgG представляют собой иммуноглобулины самого распространенного класса G (до 75% от всех видов иммуноглобулинов). Это вещества белковой природы, которые начинают вырабатываться через три-четыре недели после проникновения инфекции в организм.

При хеликобактериозе концентрация IgG в плазме крови коррелирует с активностью инфекционного процесса и постепенно снижается после эрадикации хеликобактер пилори из организма.

Следует учитывать, что слабоположительный результат анализа на антитела IgG к хеликобактер пилори сохраняется в течение месяца после полной ликвидации хеликобактериоза.

Определение антител IgA и IgМ к хеликобактер пилори

Иммуноглобулины типа М представляют собой немногочисленную фракцию относительно крупных белков (самые крупные антитела, которые, однако, составляют всего 10% от всех видов иммуноглобулинов). Данный тип антител обнаруживается в крови пациента после заражения хеликобактериозом значительно раньше, чем иммуноглобулины типа G (IgG).

IgА называют секреторным иммуноглобулином. Антитела к хеликобактер пилори типа А могут обнаруживаться не только в крови, но еще и в слюне, и в желудочном соке. Их появление свидетельствует о высокой активности процесса.

Какая норма анализа антител IgG, IgA и IgМ к хеликобактер пилори в плазме крови?

Различают количественное и качественное определение антител IgG, IgA и IgМ к хеликобактер пилори в плазме крови. При качественном определении в норме антител к хеликобактер пилори нет. В таких случаях в медицинских документах записывается: "анализ на антитела к хеликобактер пилори отрицательный".

При количественном определении антител IgG, IgA и IgМ к хеликобактер пилори используются так называемые референтные значения, нормы которых отличаются в зависимости от лаборатории, в которой производят исследование.

При этом на бланке результатов анализа всегда проставляются цифры, регламентирующие норму и патологию для референтных значений антител к хеликобактер пилори.

В некоторых лабораториях выделяют также показатели, при которых результат исследования на хеликобактер пилори расценивается как сомнительный. В таких случаях врачи советуют повторить сдачу анализа через 2-3 недели.

Расшифровка анализа крови на хеликобактер пилори

Тип антител к хеликобактер пилори	Повышение показателей	Норма
IgG	Наличие хеликобактер пилори в организме или ранний период после эрадикации	Отсутствие инфекции в организме или ранний период после заражения (до 3-4 недель)
IgМ	Ранний период после заражения	При отрицательных результатах других типов антител – отсутствие инфекции
IgА	Высокая активность инфекционного процесса	Ранний период после инфицирования, использование эффективной антибактериальной схемы препаратов (исчезает раньше IgG), отсутствие хеликобактер (при нормальных показателях других видов антител)

Что такое суммарные антитела к хеликобактер пилори?

Повышенные показатели всех видов антител IgG, IgA и IgМ свидетельствуют о высокой активности инфекционного процесса. Поэтому при оценке результатов анализа нередко учитывается еще такой показатель, как суммарные антитела.

Как правильно сдавать такой анализ, как кровь на антитела к хеликобактер пилори? Нужна ли специальная подготовка для анализа, чтобы получить достоверные результаты?

Накануне сдачи анализа на антитела к хеликобактер пилори врачи советуют не употреблять жирную пищу. Исследование проводится утром натощак.

Как проходит сдача крови на хеликобактер пилори (как берут анализ)?

Кровь на антитела к хеликобактер пилори берут из вены. При этом собранный материал помещают в пробирку со специальным гелем, сворачивающим кровь. Это делается для отделения плазмы (избавленной от клеточных элементов сыворотки крови), которую впоследствии и будут исследовать на наличие/отсутствие антител.

Как правило, процедура забора крови на исследование проходит без осложнений. В тех случаях, когда в месте венепункции образуются гематомы (синяки), пациентам советуют использовать сухое тепло, которое способствует быстрому рассасыванию излившейся крови.

Лечить ли хеликобактер пилори, если результат анализа крови (антитела на хеликобактер) повышен, но не сильно высокий? Дело в том, что у меня в последнее время появилось ощущение дискомфорта в области желудка, усиливающееся после еды. Решила сдать кровь на хеликобактер пилори. Анализ крови показал результат 1:10. На бланке есть расшифровка. Показатели антитела к хеликобактер пилори ниже 1:5 – норма, 1:5 – слабоположительный, 1 к 20 – положительный, 1:40 – резкоположительный

Описанные вами симптомы неспецифичны и встречаются при многих заболеваниях, поэтому следует обратиться к врачу (гастроэнтерологу) и пройти полное обследование.

Такие титры антител к хеликобактер пилори нередко встречаются у абсолютно здоровых людей и могут свидетельствовать о бессимптомном бактерионосительстве. Согласно статистическим данным, около половины населения Земли заражено хеликобактериозом, однако в большинстве случаев бактерия не приносит никакого ощутимого вреда организму.

Поэтому решение о эрадикации хеликобактер пилори всегда принимается после тщательного обследования и взвешивания всех показаний и противопоказаний к проведению антихеликобактерной терапии.

Анализ кала на антиген хеликобактер пилори (ПЦР)

Как определить антиген хеликобактер пилори в кале при помощи ПЦР?

Анализ кала является одним из наиболее удобных для пациентов исследований, поскольку не связан с травмированием организма и даже не требует личного присутствия больного в амбулатории. Именно поэтому анализ кала имеет особенное значение для обследования пожилых людей, детей и тяжелобольных.

Вместе с тем обнаружение бактерии хеликобактер пилори в кале представляет значительные трудности. Дело в том, что при продвижении с каловыми массами через кишечник возбудитель хеликобактериоза подвергается воздействию неблагоприятных для него факторов, прежде всего таких, как агрессивные желчные кислоты и низкое содержание кислорода. Поэтому активные формы бактерий меняют свою форму, приспосабливаясь к изменившимся условиям, а их количество значительно снижается.

Для преодоления проблем, связанных с обнаружением хеликобактер пилори в кале, используются специальный метод полимеразной цепной реакции в реальном времени (ПЦР (записаться) или РТ-ПЦР), который позволяет выявить фрагменты ДНК (генетического материала) возбудителя хеликобактериоза.

Анализ кала на антиген хеликобактер пилори ПЦР характеризуется высокой точностью (93-95%). Однако следует учитывать, что после эрадикации болезнетворной бактерии из организма данный анализ еще длительное время будет оставаться положительным за счет отхождения фрагментов ДНК погибших бактерий.

Когда можно сдать анализ кала на антиген хеликобактер пилори?

Сдать анализ кала на антиген хеликобактер пилори следует до начала антихеликобактерной терапии, поскольку прием антибиотиков и антихеликобактерных химиотерапевтических средств может исказить результаты исследования (возможен ложноотрицательный результат).

Так что если, к примеру, пациент недавно принимал по поводу какого-либо заболевания антибиотики из группы пенициллинов (амоксициллин), макролидов (кларитромицин , азитромицин) или метронидазол , то лучше подобрать другой способ диагностики инфекции хеликобактер пилори.

Кроме того, на результаты анализа может повлиять наличие патологических примесей в кале, связанных с заболеваниями желудочно-кишечного тракта, особенно его конечных отделов (кровь, желчь, слизь, гной).

Где и как сдать анализ кала ПЦР на антиген хеликобактер пилори?

Амбулаторию для исследования кала ПЦР на антиген хеликобактер пилори пациентам, как правило, подсказывает лечащий врач-гастроэнтеролог.

Минимум за трое суток до забора кала на исследование следует исключить прием большого количества пищевых волокон, красящих веществ, неорганических солей, медицинских препаратов, усиливающих перистальтику кишечника.

Не следует стимулировать стул при помощи клизмы, вазелинового или касторового масла, поскольку такой кал непригоден для исследования. Каловые массы не должны содержать мочу и другие посторонние примеси. Поэтому нельзя использовать медицинские свечи в течение трех суток перед исследованием.

Какие значения имеет анализ кала методом ПЦР на антиген хеликобактер пилори?

Результат анализа ПЦР на антиген хеликобактер пилори может иметь два значения: положительный (антиген хеликобактер обнаружен) и отрицательный (обследование не обнаружило генетического материала возбудителья хеликобактериоза).

При этом положительный результат свидетельствует о наявной или перенесенной инфекции хеликобактер пилори, а отрицательный – об ее отсутствии или нарушении правил подготовки к обследованию.

Дыхательный уреазный тест на хеликобактер пилори

Что представляет собой дыхательный уреазный анализ на хеликобактер пилори?

Дыхательный уреазный анализ на хеликобактериоз основан на способности бактерии хеликобактер пилори продуцировать специальный фермент – уреазу, защищающую микроорганизм от агрессивного воздействия желудочного сока.

В пищеварительном тракте уреаза расщепляет мочевину на аммиак и углекислый газ. Последний выделяется с воздухом при дыхании и определяется при помощи дыхательного уреазного анализа.

Существуют три модификации данного исследования:
1. Дыхательный уреазный тест (записаться) с меченной радиоактивными изотопами мочевиной;
2. 13С – уреазный дыхательный тест;
3. Хелик-тест.

Как сделать анализ на хеликобактер при помощи дыхательного уреазного теста с мочевиной, меченной изотопами углерода?

Дыхательный уреазный тест проводят с помощью меченной радиоактивным углеродом мочевины . Исследование начинается с того, что доктор предлагает пациенту подышать через трубку. Процедура проводится с полуоткрытым ртом, при этом трубка находится глубоко во рту. Дыхание должно быть свободным и спокойным. На этом этапе анализа берут две пробы воздуха.

Затем исследуемый выпивает тестовый раствор меченной изотопами мочевины, а через 15 минут сдает еще четыре пробы воздуха.

Чтобы не испортить результаты анализа попавшей в трубку слюной, пациенту рекомендуют время от времени вынимать трубку изо рта и сглатывать. В тех случаях, когда слюна все-таки попадает в трубочку, рекомендуется повторить тест через 40-60 минут.

Сегодня существуют более совершенные тестовые системы, защищающие трубку от попадания слюны. Так что о методике проведения анализа лучше заранее справится в избранной лаборатории.

Разумеется, цена дыхательного уреазного теста во многом зависит от его точности и комфортности для пациента. Как правило, стоимость данного анализа достаточно высока.

Как выявить хеликобактер пилори при помощи анализа дыхательный уреазный тест 13С?

Дыхательный уреазный тест 13С считается "золотым стандартом" в современной гастроэнтерологии. Тест основан на использовании мочевины, меченной стабильным (нерадиоактивным) изотопом 13С. Данный тест имеет следующие преимущества:

• высокая точность диагностики;
• относительная безопасность (не используются радиоактивные вещества);
• удобство для пациента.

Дыхательный уреазный тест 13С состоит всего лишь из двух проб выдыхаемого воздуха, которые пациент сдает в специальные герметизированные одноразовые пакеты.

При этом первую пробу получают утром на голодный желудок , а вторую – через полчаса после употребления нагрузочного раствора. Таким образом, общее время проведения 13С дыхательного уреазного теста не превышает 40 минут.

Выявление хеликобактер пилори при помощи дыхательного анализа хелик-тест

Хелик-тест (записаться) представляет собой модификацию дыхательного уреазного теста, где вместо изотопов меченого углерода используется карбамид. Суть анализа заключается в сравнении базального уровня содержания газа с нагрузочным, определяемым после приема пациентом раствора карбамида.

Основным преимуществом хелик-теста является его безопасность, так что он рекомендован беременным женщинам и маленьким детям, для которых прием изотопов углерода внутрь нежелателен.

Следует отметить, что многие специалисты отмечают недостаточную точность метода, из-за которой данная модификация дыхательного теста не используется за пределами РФ.

Дыхательный уреазный тест на хеликобактер пилори: как расшифровываются результаты?

В качественном отношении дыхательный тест (записаться) имеет два значения результатов: положительный (обнаружена уреазная активность хеликобактер пилори) и отрицательный (уреазная активность не обнаружена).

Количественные значения дыхательного уреазного теста определяются с помощью специального прибора масс-спектрометра. При этом различают четыре степени зараженности слизистой оболочки желудка хеликобактер пилори, определяемые по процентному содержанию стабилизированного изотопа в выдыхаемом воздухе:

• легкая (1-3.4%);
• средняя (3.5-6.4%);
• тяжелая (6.5-9.4%);
• крайне тяжелая (свыше 9.5%).

Если вы решили сдать дыхательный уреазный тест на бактерию хеликобактер пилори: подготовка

Все без исключения модификации дыхательного анализа на хеликобактер (хелик-тест и 13-С уреазный тест) требуют одинаковой достаточно серьезной подготовки.

Ограничения в пище и воде накануне сдачи анализа: допускается лишь легкий ранний ужин. С 22:00 и до утренней сдачи теста кушать категорически не рекомендуется. Питье следует исключить за один час до сдачи анализа.

Запрет алкоголя за два-три дня до исследования (выдыхаемые легкими пары алкоголя могут исказить результат теста).

Во время исследования желудок должен быть пустым, поэтому в день прохождения теста следует исключить факторы, усиливающие выделение слюны и желудочного сока (курение , жевательная резинка).

Лечащего врача следует информировать обо всех принимаемых в течение двух недель до проведения дыхательного анализа медикаментах .

Утром перед прохождением теста следует почистить зубы обычной зубной пастой и прополоскать рот. При этом нельзя употреблять средства, которые могут повлиять на состояние выдыхаемого воздуха (освежитель для рта и т.п.).

В каких случаях дыхательный уреазный тест на хеликобактер может показать ложный отрицательный результат?

Дыхательный уреазный тест может показать ложный отрицательный результат в тех случаях, когда пациент употреблял накануне исследования препараты, снижающие секрецию желудочного сока. Подобные лекарственные средства блокируют действие уреазы хеликобактера, поэтому мочевина не будет расщепляться.

Прием лекарственных средств и подготовка к тесту на хеликобактер

Прием антацидов и медикаментов, снижающих секрецию желудочного сока, необходимо прекратить за две недели до прохождения дыхательного уреазного теста.

Кроме того, исказить результаты исследования могут антибиотики и препараты из группы нестероидных противовоспалительных средств . От подобных медикаментов следует отказаться за неделю до дня прохождения теста.

Является ли положительный дыхательный уреазный тест на хеликобактер показанием к назначению схемы лечения антибиотиками?

Медицинская тактика при обнаружении хеликобактер пилори с помощью дыхательного уреазного теста определяется многими факторами: прежде всего, наличием симптомов поражения желудка и двенадцатиперстной кишки и/или других признаков хеликобактериоза.

Как правило, для определения хеликобактер пилори назначают несколько методов определения наличия бактерии в организме (к примеру, дыхательный уреазный тест + анализ кала на антиген хеликобактер пилори, или дыхательный уреазный тест + анализ крови на антитела (записаться) к хеликобактер пилори).

Уреазный экспресс тест на хеликобактер пилори при ФГДС (гастроскопия)

Еще один ответ на вопрос "как обнаружить хеликобактер пилори?" – уреазный экспресс тест при ФГДС (гастроскопия)

Способность хеликобактер пилори проявлять уреазную активность, то есть расщеплять мочевину с образованием углекислого газа и необходимого для защиты бактерии аммиака, используют не только при дыхательном тесте.

Сегодня существует возможность зрительно проникнуть в желудочно-кишечный тракт при помощи специального зонда (фиброгастродуоденоскопия, или ФГДС (записаться) ) и выбрать наиболее подозрительные участки для забора (биопсии (записаться) ) крошечных кусочков слизистой желудка – биоптатов.

Затем извлеченные при помощи микроскопических инструментов участки слизистой оболочки помещают на специальную среду, определяя уреазную активность заселяющих их бактерий.

Если биоптат заселен хеликобактер пилори, то выделяемая бактериями уреаза будет расщеплять мочевину, вызывая ощелачивание тестовой среды, так что желтый цвет индикатора сменится малиновым.

Если экспресс тест на хеликобактер положительный, что означает хеликобактер один плюс, хеликобактер два и три плюса?

Экспресс тест на хеликобактер пилори считается положительным в тех случаях, когда тестовая среда в течение суток изменила свой цвет с желтого на малиновый.

Скорость изменения цвета индикатора служит показателем выраженности уреазной активности, а следовательно, и количества бактерий хеликобактер пилори, заселяющих биоптат.

Поэтому разработана следующая шкала оценки результатов уреазного экспресс-теста на хеликобактер пилори:

• хеликобактер три плюса (+++) – значительное инфицирование (индикатор сменил цвет в течение первого часа);
• хеликобактер два плюса (++) – умеренное инфицирование (индикатор сменил цвет в течение 2-3 часов);
• хеликобактер один плюс (+) – незначительное инфицирование (индикатор сменил цвет в течение суток).

Биопсия с цитологией – точный анализ на хеликобактер

Что представляет собой биопсия и цитология как обследование на хеликобактер?

Цитология является одним из наиболее точных методов определения наличия хеликобактер в слизистой оболочке желудка. Данный метод практически полностью исключает возможность ложно положительных результатов.

Для проведения цитологического (буквально клеточного) исследования используют полученные во время фиброгастродуоденоскопии мазки -отпечатки. Биопсию стараются производить из наиболее подозрительных участков, исключая язвы и эрозии (спиралевидные бактерии не обитают на грубо поврежденной слизистой).

В случае обнаружения, хеликобактер пилори свободно располагаются в желудочной слизи. У них характерная спиралевидная форма, при этом встречаются бактерии в виде латинской буквы S, а также изогнутые в виде крыльев летящей птицы микроорганизмы.

Как определить количество хеликобактер пилори по результатам цитологии? 3 степени обсемененности патогенными бактериями

Проведенная после биопсии цитология слизистой оболочки дает два возможных качественных значения: отрицательный результат или норма (бактерий не обнаружили) и положительный (если выявили хоть одну бактерию хеликобактер пилори).

В количественном отношении различают три степени обсемененности хеликобактер пилори:

• слабая обсемененность (+) – в поле зрения микроскопа при увеличении в 360 раз обнаруживается до 20 бактерий хеликобактер;
• умеренная обсемененность (++) – в поле зрения обнаруживается от 20 до 40 микробных тел хеликобактер;
• высокая обсемененность (+++) – в поле зрения обнаруживается более 40 бактерий хеликобактер пилори.

У мужа результат анализа крови на хеликобактериоз положительный (анти хеликобактер пилори IgG 8). Какие титры антител IgG к хеликобактер пилори являются показанием к обследованию ближайших родственников на хеликобактериоз? Какое исследование на хеликобактер пилори лучше пройти, чтобы определить, норма у меня или патология?

В тех случаях, когда у пациента впервые выявляют инфекцию хеликобактер пилори, всем его близким родственникам советуют пройти исследование на хеликобактериоз. Величина титров при этом значения не имеет.

Чтобы с уверенностью исключить патологию, желательно пройти два анализа на хеликобактер пилори разными методами (к примеру, анализ кала на антиген к хеликобактер и анализ крови на антитела, или хелик-тест и анализ крови на антитела).

Хеликобактериоз особенно опасен в отношении развития гастрита и язвенной болезни двенадцатиперстной кишки, поэтому понадобится консультация гастроэнтеролога , который возможно направит на дополнительное обследование (фиброгастродуоденоскопия - ФГДС, рН-метрия (записаться) , биопсия).

К какому врачу обращаться?

При подозрении или выявлении Helicobacter Pylori следует обращаться к врачу-гастроэнтерологу (записаться) , так как именно этот специалист занимается терапией заболеваний, спровоцированных данным микроорганизмом (хеликобактериоз, гастрит

Бактерия Helicobacter pylori (хеликобактер пилори) обитает в клетках слизистой оболочки желудка и двенадцатипёрстной кишки человека. Некоторые штаммы (генетические типы) микроорганизма выделяют специфические токсины, разрушающие клетки и повышающие риск возникновения таких патологий, как хронические гастриты и дуодениты, язвенная болезнь желудка и двенадцатипёрстной кишки, некоторые виды злокачественных опухолейа. Такие штаммы необходимо своевременно выявлять и лечить. Одним из способов определения инфицирования Helicobacter pylori является анализ кала.

Механизм определения хеликобактера с помощью анализа кала

ПЦР (полимеразная цепная реакция), культуральный и иммунологические анализы кала относятся к прямым методам исследования. В отличие от косвенных методов, когда о наличии патологического агента судят по присутствию продуктов его жизнедеятельности или реакции иммунной системы организма (выработка антител), прямые методы обнаруживают непосредственно сам микроорганизм или его ДНК.
Все виды анализа кала на хеликобактериоз являются неинвазивными (нетравматичными) видами исследования в отличие от забора крови или гастродуоденоскопии.

Молекулярная диагностика

Для проведения ПЦР используют специальный прибор - амплификатор

ПЦР-метод является одним из видов молекулярно-генетической диагностики и позволяет определить наличие Helicobacter pylori даже в случае присутствия в материале небольшого фрагмента ДНК бактерии.

Суть метода состоит в многократном умножении анализируемого образца возбудителя заболевания. Для проведения реакции необходим своего рода «каркас», состоящий из двух праймеров – полученных с помощью искусственного синтеза фрагментов ДНК, идентичных нуклеиновой кислоте Helicobacter pylori. Во время реакции между праймерами наращивается цепочка ДНК в случае присутствия в кале фрагмента биоматериала микроорганизма. В случае его отсутствия реакции не происходит.

Реакция проводится при определённых значениях температуры и кислотности среды, состоит из нескольких десятков повторяющихся циклов, для катализа (ускорения реакции) применяется специальный фермент – полимераза. За 30 циклов фрагмент ДНК патологического агента, присутствующий в биоматериале, умножается в миллиард раз, что позволяет с точностью диагностировать инфекцию.

При наличии соответствующих праймеров можно выявить инфицирование цитотоксичными (повреждающими клетки слизистой желудка) видами Helicobacter pylori.

Культуральный анализ

Культуральный анализ (бактериологический посев) является микробиологическим методом исследования.

Биологический материал помещается в специфическую среду, благоприятную для роста бактериальной колонии. По истечении определённого срока (для Helicobacter pylori – более недели) культуру изучают под микроскопом, используя для верной идентификации колонии различные методы – окраску, способность вступать в те или иные биохимические реакции.

Кроме выявления патологического антигена (возбудителя заболевания) метод позволяет провести тест на его чувствительность к антибактериальным препаратам, что сокращает сроки и затраты на лечение, повышает эффективность терапии.

К сожалению, в некоторых случаях результаты теста на чувствительность in vitro («в пробирке») могут не совпадать с результатами лечения in vivo (живого организма): в жизни антибиотики, подобранные лабораторным методом, могут быть не столь эффективны.

Иммунологические методы анализа

Иммунологические методы основаны на свойстве антител слипаться с антигеном. Для исследования антитела со специальными метками соединяются с анализируемым образцом, в результате, при наличии в материале Helicobacter pylori, образуются комплексы антиген-антитело.

Показания к проведению обследования

Все виды диагностики инфицирования Helicobacter pylori имеют свои преимущества и недостатки. Целесообразность применения того или иного метода зависит от разных факторов и этапов лечения. Оптимальный способ исследования выбирает врач-гастроэнтэролог .

Показания к ПЦР-анализу кала:

• язвы, и двенадцатипёрстной кишки;
• атрофия слизистой оболочки желудка;
• полипы, опухоли желудка;
• гастроэзофагеальный рефлюкс (заброс содержимого желудка в пищевод), язва пищевода;
• генетическая предрасположенность: злокачественные опухоли желудка у ближайших родственников (родителей, родных братьев и сестёр);

Исследование ПЦР-методом оптимально назначать для оценки целесообразности проведения специфического лечения антибактериальными препаратами при имеющихся органических повреждениях.

Показание к культуральному анализу – определение чувствительности к лекарственным препаратам при неэффективности эмпирического лечения. Поскольку анализ является сложным (посев требует специальной среды и отсутствия доступа кислорода) и долгосрочным, это исследование не назначается для диагностики инфекции.

Бактериологический посев способен выделять только спиралевидные формы Helicobacter pylori, но не кокковые, получившие в последнее время широкую распространённость. Этот факт дополнительно снижает ценность исследования.

Показания к иммунологическим методам:

• симптомы функциональных и органических патологий желудка и кишечника:
  • , отрыжка;
  • боли, имеющие периодичность в течение суток с обострениями весной и осенью;
  • поносы или запоры;
  • ощущение дискомфорта, переполнения желудка;
• перед назначением длительной терапии нестероидными противовоспалительными препаратами или ингибиторами протонной помпы (средствами для снижения выработки соляной кислоты);
• железодефицитная анемия или тромбоцитопения невыясненной этиологии;
• генетическая предрасположенность;
• инфицирование ближайшего окружения;
• контроль эффективности антибиотикотерапии.

Иммунологические методы и ПЦР без генотипирования назначаются с целью скрининга – ввиду простоты и относительно низкой стоимости исследование проводится широким массам населения для выявления группы риска развития органических и опухолевых поражений желудка и кишечника.

К сожалению, в России скрининг на Helicobacter pylori не получил широкого распространения.

Иммунологический анализ проводится до инструментальных методов исследования при соответствующей симптоматике и позволяет предположить инфицированность Helicobacter pylori. По результатам анализа в случае необходимости назначаются другие методы исследования.

Преимущества и недостатки ПЦР-анализа кала

Специфическая терапия хеликобактериоза антибактериальными препаратами – процесс длительный, сопровождающийся плохой переносимостью у многих больных и высоким риском развития осложнений.

Назначение антибиотиков всем лицам, инфицированным Helicobacter pylori, - порочная практика. Специфическая антибиотикотерапия показана лишь пациентам с тенденцией к прогрессированию органических поражений – эрозий, язв, атрофического процесса, - как правило, заражённым определёнными штаммами хеликобактера. Этим больным требуется антибиотикотерапия с целью достижения ремиссии при язвенной болезни и предупреждения риска развития злокачественных новообразований.

Выявить цитотоксичные типы Helicobacter pylori можно только посредством ПЦР-метода.

Преимущества ПЦР-анализа кала:

• высокая чувствительность метода;
• высокая специфичность теста;
• простота и неинвазивность забора материала;
• безопасность;
• возможность выделения как спиралевидных, так и кокковых форм Helicobacter pylori;
• возможность выделения различных штаммов бактерии.

Чувствительность теста – способность к выдаче истинно положительных результатов. Чем выше чувствительность, тем ниже доля ложноположительных результатов, когда антиген якобы выявляется у неинфицированных лиц.

Специфичность теста – показатель, зависящий от количества ложноотрицательных (когда у инфицированного больного антиген не выделяется) результатов исследования. ПЦР-метод исследования кала на Helicobacter pylori характеризуется чувствительностью 64–94% и стопроцентной специфичностью.

Собрать кал легко и просто. В отличие от забора крови или гастродуоденоскопии взятие материала не требует применения местных анестетиков, на которые может развиться аллергическая реакция, не причиняет боли и дискомфорта, безопасно в плане заражения «грязным» инструментом. Исследование не требует приложения определённых усилий, как, например, дыхательный метод, что делает его доступным даже для маленьких детей.

Недостатки ПЦР-анализа кала:

• отсутствие возможности определения чувствительности к антибактериальным препаратам;
• отсутствие возможности различать текущую инфекцию и успешно излеченную, когда фрагменты ДНК бактерии могут оставаться в фекалиях около месяца;
• более низкий показатель чувствительности по сравнению с исследованием биоптата (образца ткани или клеточной массы) слизистой желудка;
• относительно высокая стоимость анализа с генотипированием;
• строгие требования к персоналу: квалификация, неукоснительное соблюдение правил, аккуратность.

Один из основных недостатков ПЦР-метода является продолжением его основного достоинства: высокая чувствительность теста является причиной ложноположительных результатов в случае контаминации («загрязнения» извне) анализируемого материала.

Подготовка к сдаче анализа

Достоверность результата любого анализа зависит от чёткого выполнения определённых условий на всех этапах, и забор материала – не исключение.

Правила взятия материала:

• за трое суток до анализа отменяются антибиотики, слабительные, замедляющие перистальтику препараты, ректальные свечи и некоторые другие лекарства по наставлению врача, поэтому следует предупредить доктора о применении тех или иных лекарственных препаратов;
• сбор кала осуществляется в выданную лабораторией посуду, рекомендуется отбирать пробы из трёх разных точек;
• биоматериал желательно доставить в лабораторию немедленно; в случае отсутствия такой возможности пробу следует хранить при температуре 2–8 градусов не дольше 24 часов;
• если анализ выполняется для оценки эффективности назначенной ранее антибиотикотерапии против Helicobacter pylori, кал собирается не ранее, чем через четыре недели после окончания лечения.

Замедление пассажа каловых масс, запоры могут приводить к разрушению хеликобактера в фекалиях, что является причиной ложноотрицательных результатов. Для повышения достоверности результата врач может назначить перед анализом лёгкое слабительное – лактулозу.

Как и где сдать анализ

Анализы назначает гастроэнтеролог, поэтому перед исследованием на Helicobacter pylori необходима его консультация.

Примерная стоимость исследования кала:

• ПЦР-метод с генотипированием – 1200 рублей;
• ПЦР без генотипирования – 600 рублей;
• чувствительность к антибиотикам – 600 рублей;
• иммунологические методы – 400–650 рублей (в зависимости от метода).

Для наиболее точной диагностики Helicobacter pylori необходимо выбирать медицинское учреждение, заслужившее хорошую репутацию.

Результаты исследования

Период обработки анализов, их достоверность зависят от метода определения антигена.

Сроки выполнения, достоверность и интерпретация результатов анализов кала на хеликобактериоз.

	Сроки	Достоверность	Результаты
ПЦР	от 5–6 часов (экспресс-метод) до 2 дней	высокая	1) отрицательный – не выделено ни одного заявленного генотипа бактерии; 2) положительный – хелибактериоз (текущий или в анамнезе), выделено не менее одного из заявленных генотипов
Бактериологический анализ на чувствительность к антибиотикам	7–10 дней	высокая – на чувствительность; низкая – на выявление антигена	1) количество бактерий 0 – хеликобактер не выделен; 2) количество >0 - хелибактериоз; 3) S – чувствительность к указанному антибиотику; 4) R – резистентность (устойчивость) к антибиотику; 5) I – умеренная чувствительность к антибиотику.
Иммунологические методы	1 день	низкая	1) отрицательный - возбудитель не выявлен; 2) положительный - хеликобактериоз

Низкая достоверность иммунологического и культурального анализа объясняется малымсодержанием антигена в фекалиях: если ПЦР-анализ чувствителен и при наличии 10 клеток, то для достоверного результата других методов клеток должно быть хотя бы в 10 раз больше.

Исследование кала на хелибактериоз безопасно, нетравматично и может осуществляться разными методами, позволяющими обнаружить инфекцию, определить штаммы вируса и чувствительность патогена к антибиотикам.

По результатам анализов можно сформировать группу риска, у представителей которой высока вероятность развития язвы желудка и двенадцатипёрстной кишки, злокачественных опухолей желудка; оценить степень риска и минимизировать его своевременным антибактериальным лечением цитотоксичных штаммов хеликобактериоза.